BIE（Bioenno Tech LLC／バイオエノテック）社　sliceGolgi Kit（#003760）を用いてゴルジ染色、更に免疫染色との二重染色(D～E)を行った。

A～C: 生後12日（P12）のC57BLマウスからフリーフローティング切片（厚さ100～200 um）を作製しニューロンを染色した。
（A）視床下部外側野（LHA）のニューロン。多数の樹状突起フィロポディア（矢じり部）が観察される。
（B）前頭皮質（FC）のニューロン。成熟したスパイン（矢印）や樹状突起フィロポディア（矢じり部）が見られる。
（C）前頭頭頂皮質(運動野)の錐体細胞。

D～E: ゴルジ染色と免疫染色の二重染色例。
厚さ50～100 umフリーフローティング切片をまずゴルジ染色（22±1℃で2～4日）し、その後免疫細胞染色を行った。
（D）マウス海馬台（4ヶ月齢のC57マウス）
（E1）マウス前頭頭頂皮質の体性感覚野（2ヶ月齢のC57BLマウス）
（E2）上記E1の拡大図。樹状突起スパイン（矢印）および免疫染色で標識されたニューロン（矢じり部）が見られる。

The sliceGolgi Kit was used to perform Golgi-staining alone and combined Golgi-staining and immunohistochemistry/immunocytochemistry (ICC).

A-C: The sliceGolgi Kit was used to impregnate and stain neurons in 100 ? 200 micron thick, free-floating sections of postnatal day 12 (P12) C57BL mouse.
(A) a stained neuron in the lateral hypothalamic area with numerous filopodia-like protrusions (arrowheads);
(B) a neuron in the frontal cortex with mature spines (arrows) and filopodia (arrowheads). This neuron has a giant cell body;
(C) the main (stem) and oblique dendrites of a pyramidal neuron in the motor area of the frontoparietal cortex.

D-E: The combination of Golgi-staining and ICC allows simultaneous visualization of dendritic spines and immunoreactive products.
Golgi-staining was first performed on 50?100 micron thick, free-floating sections, followed by ICC. The impregnation time was 2?4 days at 22 ± 1oC.
Images were taken from the subiculum of a 4-month old C57 mouse (D) and from the frontoparietal cortex (somatosensory area) of a 2-month old C57BL mouse (E). Boxed areas in E1 were magnified (63×) (E2) to highlight the dendritic spines (arrows) and immuno-labeled neurons (arrowheads).